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GTS40-3-2轉基因大豆ERM-BF410cp的定性PCR檢測

作者:東莞市中億生物科技有限公司   日期:2022-12-02

東莞市百順生物科技有限公司是BCR/IRMM/ERM的代理商,專業代理耐除草劑轉基因大豆GTS40-3-2 ERM-BF410cp 標準品。


在轉基因研究中,將同一種外源基因轉入不同 作物、不同品種,形成具有相同遺傳性狀的不同轉基 因品系。由于同一外源基因在不同的作物中的表達 效率不盡相同,有的研究人員便將外源基因進行一 定修飾后再轉入受體中以提高其表達效率。這增加 了對轉基因產品品種鑒定的復雜性,也給轉基因產 品的檢測帶來了難度¨引。隨著生物技術的不斷發 展,轉基因生物及其產品得到越來越廣泛的應用而 流向市場。


目前。GTS40-3-2耐除草劑轉基因大豆可能已 被進口到我國用作加工原料,我國必須加強監管以 防止其在進口、運輸、加工或銷售過程中存在流散到 環境中的可能性。而建立轉基因大豆GTS40—3-2的 檢測標準是進行安全監管的前提。雖然我國已建立 了轉基因大豆檢測方法的相關標準¨L19J,但這些標 準僅針對轉基因大豆構建特異性,其在轉基因大豆 的檢測中已逐漸顯現出局限性,無法依靠它精確檢 測轉基因大豆品系。為解決在檢測工作中遇到的這 個問題,應有關部門的要求,本研究建立了GTS40-3-2轉化體特異性PCR檢測技術。


本文根據已公布 的轉基因大豆GTS40-3-2的外源基因與大豆基因組 旁側序列相關信息,設計了5對品系特異性引物,從 中選取了一對特異性好、擴增效率高的引物,優化了 PCR反應的引物濃度和退火溫度,建立了轉基因大 豆GTS40—3-2轉化體特異性的定性PCR檢測方法, 并驗證了其檢測轉基因大豆GTS40—3-2的品系特異 性,其檢測最低極限(靈敏度)可達0.05%,遠遠高 出了歐盟轉基因產品最低標識閾值(0.9%)。6家 國內具有資質的實驗室對本研究建立的方法進行循 環驗證的結果也表明,該方法成本低、效率高,具有 特異性強、靈敏度高、重復性好的優點,其技術參數 能夠滿足我國轉基因生物安全管理過程中對 GTS40-3-2大豆的檢測需求,具有廣泛的實用性和 良好的應用前景。若將該技術轉化成國家技術標 準,將有望成為我國轉基因大豆及產品成分檢測的 重要參考依據,不僅能夠滿足我國轉基因生物安全 管理的需要,還可準確鑒定出利用轉基因大豆 GTS40-3-2作為親本非法轉育出的衍生品種,從而 防止轉基因大豆G1Ⅸ0—3-2流散到環境中造成生態 風險。


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